一、生物顯微鏡校準內容（róng）

JJF1402-2013《生物顯微鏡校準規（guī）範》，引用的是GB/T2985-2008《生物顯微鏡》，除了（le）增加示值誤差一項，其他項目及技（jì）術要求均引（yǐn）用自該標準。

在鏡（jìng）檢時，操作者需要的是清晰而明亮的圖像，這與顯微鏡的各項光學技（jì）術參數（shù）相關，並且要（yào）求在使用時，必須根據鏡檢的目的和（hé）實際情況來協調各參數的關係。隻有（yǒu）這樣，才能充分發揮顯微鏡應有的（de）性能，得到滿意的鏡檢效果。

顯微鏡的光學技術參（cān）數包括:數值孔徑、分辨力、放大倍數、焦深（shēn）、清晰範圍（wéi）、工作距（jù）離等。這些參數並不都是越高越好，它們之間是相互聯係又相互製約的。在使用時，應根據鏡檢的目的和實際情（qíng）況來（lái）協調參數間的（de）關係，但（dàn）應以保證（zhèng）分辨力（lì）為準。放大倍數、左右係統倍（bèi）數差、視場中心差雖然也會影響觀察，但是要（yào）求不高（gāo），關鍵是能看清圖像。隻做觀察用的顯微鏡並沒有（yǒu）尺寸測量功能，示值（zhí）誤差的校準不適用於這類顯微（wēi）鏡。

    在GB/T2985-2008中,是通過成像清晰（xī）範圍（wéi）進行性能（néng）檢查（chá）的,不同的物鏡倍數不但要求達到相應分辨力水平,還要求保證在一（yī）定視場範圍內都能達到。JJF1402-2013沒有包含分辨（biàn）力這一測量項目是不科學的。
    

二、校準用標準器

JJF1402-2013中，校準顯微鏡放大倍數誤差（chà）和顯微鏡左右（yòu）兩係統放大倍數差所提到的"倍率（lǜ）計"，容易產（chǎn）生誤解。倍率計是用來測量（liàng）望遠鏡放大率的，有相應的標準GJB/J3360-1998《倍率計檢定規程（chéng）》，其結（jié）構（gòu）本身是一種低倍顯微鏡，不能用來測量（liàng）顯微鏡的放（fàng）大率。測量顯微鏡總放大率隻能使用測量（liàng）望遠鏡，也叫顯微鏡總放大率測定儀。
    

三、校準方法

1.顯微鏡物鏡放（fàng）大倍數誤差

根據JJF1402-2013之（zhī）6.2.1.2，對於目鏡不可拆卸的（de）顯（xiǎn）微鏡（jìng），其物鏡放大倍數通過測量計算總放大倍數後，除以目鏡放大倍數實測值得到。目鏡放大（dà）倍數如何測得（dé）未作任何描述。根據GB/T2985-2008，目鏡需要拆卸下來（lái），使（shǐ）用焦距儀按公式計算得到。

在不拆卸目鏡的情況下，可以將已知放大倍數的（de）標（biāo）準物鏡安裝在被測（cè）顯微鏡鏡架上（shàng），與（yǔ）待測目鏡組成完（wán）整的光路係（xì）統，通（tōng）過JJF1402-2013之6.2.1.2的方法計算總放大倍數，除以標（biāo）準（zhǔn）物鏡的放（fàng）大倍數得出待測目鏡的放大倍（bèi）數。得（dé）到目鏡放大倍數後，再使用待測物鏡與目鏡重新組成光路係統，測出總放（fàng）大倍數，除以目鏡放大（dà）倍數實測值，從而得出待測物鏡放大倍數。

2.雙目顯微鏡左右兩（liǎng）係統放大倍數差

該（gāi）校準項目測量方法描（miáo）述有兩處錯誤:

(1)方（fāng）法中計算的是差值的絕（jué）對（duì）值，而計量（liàng）特性要（yào）求裏允差卻是相對值的2%。如果以絕（jué）對誤差（chà）來計算差值，方法中卻未描述是使用多少倍物鏡測量。而采用相對誤（wù）差時，雖然物鏡倍數不影響結果，但從（cóng）嚴謹的角度，還是需要完整描述所使用物鏡的倍數。

(2)方法中提到"按6.2.1.2的步（bù）驟，對左右兩個觀察係統的放大倍數分別（bié）進行測量，依（yī）據公式(1)計算（suàn）得（dé）到兩觀察係統放大倍數"(此處引用公（gōng）式為（wéi）JJF1402-2013中的公（gōng）式)。步驟6.2.1.2，即使用總放大率測定儀的方式（shì）計算放大倍數，間距像的長度是測定儀上測（cè）到的，實際的倍率計算見公式(1)。

式（shì）中:M_T--顯微鏡總放大率；Y₀--測定儀上（shàng）物鏡測微（wēi）尺、分劃刻線重合的長度，mmY_e-測微尺上所用間距，mm；K--測定儀的常數。

由式(1)可知，實際放大倍數的（de）計算並不是由JJF1402-2013中的式（shì）(1)計算得到的（de）。
    

四、物鏡放大（dà）倍數誤差測量結果的不確定度評定

 附錄B顯微鏡物鏡放大倍數誤差測量結（jié）果不確定度評定（dìng）也有兩處錯誤。

1.B.2是無法由B.1轉換得到的，不能這樣（yàng）處理（lǐ）。

根據物鏡放大倍數誤差計算公式
    

式中:Δβ--物（wù）鏡放大倍數（shù）誤差；L_i--標準玻璃線紋尺所用間距的像在目鏡分劃尺上的實際長度，mm；L₀--標準玻璃（lí）線紋尺所用間距（jù）的像在目鏡分劃（huá）尺（chǐ）上的標稱長度，mm。

分別對式(2)中（zhōng）的L_i和L₀求偏導（dǎo），求得靈（líng）敏係（xì）數
    

由於在正常情況下Li與L0數值很接近，可將（jiāng）L_i≈L₀，式(3)可簡化為
    

故不（bú）確（què）定度的大小跟測量所（suǒ）用的間距關係很大，同（tóng）等物鏡倍（bèi）數情況下，選用間距越大，不確定度越小。

2.對於B.5.2.1標準玻璃線紋尺不（bú）準引入的標準不（bú）確定度，計算時隻考慮到線紋尺本身（shēn）的誤差，但實際測量時，線紋尺像是經過物鏡放大後再與目鏡分劃（huá）尺（chǐ）比較讀數的，其影響量應該乘以係數K′(K′為物鏡放大倍數)。

此外，附錄B測量不（bú）確定度評定的測量模型適用於目鏡可拆卸的顯微鏡。對於無法拆卸目鏡，需使用放大（dà）率測定儀的顯微鏡，其放大倍數誤差測量結果不確定度還需另（lìng）外評定，這是容易忽略的。

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本文刊發於《中國計量》雜誌2018年第9期
作（zuò）者：廣州計量檢測技術研究院 楊昭信