世界上最小的生物反應(yīng)器在美問世 (2005-05-20)
發布時間:2007-12-04
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利用在小水滴中包裹多個單細胞或單(dān)細胞器的方法,可以將光學誘捕法和微流控小滴生成技術結合在一起。
目前(qián),傳統的試(shì)管檢測技術正逐步(bù)被淘汰。由於微流(liú)控技術使得在(zài)日(rì)益小型化的容積(jī)內研究生化反應過程變得可能,實驗室級的研究正向納米級方向深入發展。美(měi)國華盛頓大學的Daniel Chiu及其同事,在最近發明了一種新方法,即僅用10-12升到10-15升的小水滴就可以包裹住多個單細胞或單細胞器。
在近期《分析化學》雜誌上的(de)一篇文章中,Chiu及其同事提出了兩(liǎng)種新方法,這兩種方法可以將微流控小(xiǎo)滴生成技術(shù)和光(guāng)學誘捕法結合在一起,以便有選擇性地、穩定地包裹(guǒ)某個單細胞或細胞器。一種方法是利用T型槽,在T型槽內水相可以被(bèi)垂直地(dì)導入到流動(dòng)的油相內。當對水相施加(jiā)壓力時(shí),流動的油可以連續切斷小水滴。另一種方法是利用壓縮槽,在壓縮槽內水相被擠壓通過狹窄的管道,並流入到一個大(dà)的油池中。被(bèi)堵住(zhù)的水在管(guǎn)道內形成小水滴,然(rán)後進入油(yóu)池中。在這兩種(zhǒng)方法中,利用光學鑷子將細胞(bāo)或細胞器放在油(yóu)水界麵上,這樣微粒就被包裹在正在形(xíng)成(chéng)的小滴中。Chiu認為,與以前的微流(liú)控技術設計相比,這兩種方法有(yǒu)了(le)明顯改進,“利用光學方法移動(dòng)細胞具有(yǒu)極好的可控製性和(hé)靈活性”。
具有較高表麵電荷的微(wēi)粒(如細胞或細胞器)一旦在小水滴中被捕(bǔ)獲,它們就不(bú)能穿過水油界麵恢複到原來的狀(zhuàng)態(tài),並被穩定地限製。Chiu的(de)研究小組(zǔ)現已成功對單個B淋巴細胞和單個線粒體進行(háng)了包(bāo)裹,這表明利用該方法研究單細胞和單細胞器頗具潛力。Chiu解釋說,“研(yán)究單細(xì)胞很有意義,因為(wéi)每個細胞都是不同的”,“這種方法不僅僅用於(yú)研究普通細胞,也可以用於研究稀有細胞。”
由於微(wēi)粒被固定在比其自身體積還小(xiǎo)的小滴中,因而細(xì)胞內含物(wù)在(zài)溶解前和溶解後的(de)濃度保(bǎo)持不變,這一點對於利(lì)用(yòng)單細胞進行生(shēng)化分析非常關鍵。為了說明利用該(gāi)方法進行此類研究的作用,研究者進行了(le)酶(méi)活性分析(xī)實驗。一個包含熒光素β-D-2-吡喃半乳糖(FDG,是細胞內(nèi)β-半乳糖苷(gān)酶的(de)熒光底物)的小水滴捕獲了一個堅果細胞,隨著(zhe)光解和β-半乳糖(táng)苷(gān)酶的釋放,小水滴中(zhōng)的反(fǎn)應產物?熒光素不斷積(jī)累,這使小水滴中熒光素含(hán)量非常高。如果沒有微(wēi)小水滴容(róng)積的限製(zhì),稀釋(shì)作用會使熒光素難以被示蹤顯示。Chiu說(shuō),“你(nǐ)可以用分辨率很高的顯微鏡來觀察細胞和亞細胞的結構,但你無法通過顯微鏡獲得更多的(de)生化信息。”“我們正努力開發一個平台,使我們能夠在非常小的尺度上做些改變,並能(néng)在細胞或細胞器水平上獲(huò)取一些(xiē)信息,而通常這些信息隻有通過(guò)大量的生化分析才能得到。”