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世界上最小的生物反應器在美問世 (2005-05-18)

發布時間:2007-12-04 作者: 來源:儀器信息網 瀏(liú)覽(lǎn):835
利用(yòng)在小水滴中包裹多個單細胞或單細胞器的方法,可以將光(guāng)學誘捕法和微流控小滴生成技術結合在一起。   目前,傳統的試管(guǎn)檢測技術正逐步(bù)被淘汰。由於微流控技術使得在(zài)日益小型化的容積內研究生(shēng)化反應過程變得可能,實驗室級的研究正向納米級方(fāng)向深(shēn)入發展。美國華(huá)盛頓(dùn)大學的Daniel Chiu及其同事,在最近發明了一(yī)種新方法,即僅用10-12升到10-15升的小水滴就可以包裹住(zhù)多個單細胞或單細胞(bāo)器。   在近期《分析化學》雜誌上(shàng)的(de)一(yī)篇文章中,Chiu及其同事提出了兩種新方法,這兩種方法可以將微流控小滴生成技術和光學誘捕法(fǎ)結合在一起,以便有選(xuǎn)擇性地、穩定地包裹某個單細胞或細胞器。一(yī)種方法是利(lì)用T型槽,在T型槽內水相可以被垂(chuí)直地導(dǎo)入到流動的(de)油相內。當對(duì)水相施加壓力(lì)時,流動(dòng)的油(yóu)可以(yǐ)連續切斷小水滴。另一種方法是利(lì)用壓縮槽,在壓縮槽內水相被擠壓(yā)通過狹(xiá)窄的管道,並流入到一個大的油池中。被堵住的水在管(guǎn)道內形成小(xiǎo)水(shuǐ)滴,然後(hòu)進入油池中。在這兩種方法中,利用光學(xué)鑷(niè)子將細胞或細胞器放在油水界麵上,這樣微粒就被包裹在正在形成的小滴中。Chiu認為(wéi),與以前的(de)微(wēi)流控技術設計相比,這兩種方(fāng)法有了明顯改進,“利用光學方法移動細胞具有(yǒu)極好的可控製性和靈(líng)活性”。   具有較(jiào)高表麵電(diàn)荷的(de)微粒(如細(xì)胞或細胞(bāo)器)一(yī)旦在小水(shuǐ)滴中被捕獲,它們就不能穿過水油(yóu)界麵恢複到原來的狀態(tài),並被穩定地限製。Chiu的研究小組現已成功對單個B淋(lín)巴細(xì)胞和單個線粒體進行了包裹,這(zhè)表明利用該方法研究單細胞和單(dān)細胞器頗具潛力。Chiu解釋說,“研究(jiū)單細胞很有意義,因為每個細胞都是不同的”,“這種方法不僅僅用(yòng)於研究普通細胞,也可以(yǐ)用於研究稀有細胞(bāo)。”   由(yóu)於微粒(lì)被固定(dìng)在比其自身體積還小的小滴中,因而細胞內(nèi)含物在溶解前和溶(róng)解後的濃度保持不變(biàn),這一(yī)點對於利用單細胞進行生化分析非(fēi)常關鍵。為了說(shuō)明利用該方法進(jìn)行此類研究(jiū)的作用,研究者進行(háng)了酶活性分析實驗。一個包含(hán)熒(yíng)光素β-D-2-吡喃半乳糖(FDG,是(shì)細胞內β-半乳糖苷酶的熒光底物)的小(xiǎo)水滴捕獲了一(yī)個堅(jiān)果細胞(bāo),隨著光解和β-半乳糖苷酶的釋放,小(xiǎo)水滴中的反應產物?熒光素不(bú)斷積(jī)累,這使小水滴中熒(yíng)光素含量非常高。如果沒有微小水滴容積的限製,稀釋作用會使熒光(guāng)素難以(yǐ)被示蹤顯示。Chiu說,“你可以用分辨率很高(gāo)的顯微鏡來觀(guān)察細胞和亞細(xì)胞的結構,但你無法通過顯(xiǎn)微鏡(jìng)獲得更多的生化信息。”“我們正努力開發一個平台,使我們能夠在非常小的尺度上做些改變,並能在細胞或細(xì)胞(bāo)器水平上獲取一些信息,而通常(cháng)這些信息(xī)隻有(yǒu)通過大量的生化分析才能得到(dào)。”
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